Definícia fázovej kontrastnej mikroskopie
Nezafarbené živé bunky neabsorbujú takmer žiadne svetlo. Slabá absorpcia svetla má za následok veľmi malé rozdiely v rozložení intenzity obrazu. Vďaka tomu sú bunky sotva viditeľné alebo nie sú viditeľné v mikroskopii vo svetlom poli. Mikroskopia s fázovým kontrastom je technika optickej mikroskopie, ktorá premieňa fázové posuny svetla prechádzajúceho cez priehľadné vzorky na zmeny jasu v obraze.
Prvýkrát ho opísal v roku 1934 holandský fyzik Frits Zernikes.
Princípy mikroskopie s fázovým kontrastom
Pri prechode svetla bunkami dochádza k malému fázovému posunu, ktorý je ľudským okom neviditeľný. V mikroskopii s fázovým kontrastom sa tieto fázové posuny premieňajú na zmeny amplitúdy a možno pozorovať rozdiely v kontraste obrazu.
Fázová kontrastná mikroskopia funguje
Čiastočne koherentné osvetlenie vytvárané volfrámovo-halogénovou výbojkou je nasmerované cez kolektorové zrkadlo a zaostrené na vyhradený prstenec (označený kondenzorový prstenec) umiestnený v prednej ohniskovej rovine podstupňového kondenzora.
Čelo vlny prechádzajúce prstencovým priestorom osvetľuje vzorku a nie je vychýlené ani fázovo difraktované a oneskorené štruktúrou a fázovými gradientmi prítomnými vo vzorke.
Nefraktované a difraktované svetlo zhromaždené šošovkou objektívu je izolované fázovou doskou v zadnej ohniskovej rovine a zaostrené na strednú obrazovú rovinu, čím sa vytvorí konečný fázový kontrastný obraz pozorovaný v okuláre.
